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HUVEC (永生化人脐静脉内皮细胞)
产品概述:
HUVEC (永生化人脐静脉内皮细胞)
产品描述
种属:人源(Homo sapiens)
组织来源:转化细胞系
年龄:未知
性别:未知
细胞类型: 上皮样细胞(Epithelial)
生长特性: 贴壁生长(Adherent)
收件处理
1 、收件请立即检查包装袋是否有破损或漏液。对于冻存细胞,若发现冻存管破损、箱内已无干冰,请拍照后及时联系供货商。对于复苏细胞,收到细胞后,若发现培养瓶破损、漏液、培养基浑浊或污染,请拍照后及时联
系我们。
2、如为冻存管,请收到后立即解冻培养。若来不及解冻,请储存于液氮中(存储于负80度,会降低细胞存活率)。
特别提醒:复苏的细胞请勿放冰箱,冷冻冷藏都 不可 以,这 是活细 胞, 不是试 剂, 切记!!!
注意事项
使用范围
本产品仅供科学研究使用,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
完全培养基
该细胞系培养所用基本培养基为DMEM,配制完全培养基需加入1 0 % F B S , 1% 青-链霉素。
细胞冻存
离 心 收 集 细 胞 后 , 加 入 适量冻存液(每管细胞冻存量达到 10 的 6 次 方 ) , 将 冻 存 管 放入冻存盒置于负80冰箱, 24h后将冻存管转入液氮长期保存。
细胞形态
40X 100X
培养瓶寄送细胞操作步骤
对于贴壁培养的细胞,寄送前,我们会将运输培养基(收到后请使用完全培养基培养)充满整个培养瓶,以减少产品运输过程中贴壁细胞的脱落。
1. 收到细胞产品后,请注意观察是否有污染。 将培养瓶置于倒置显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。因在运输过程中存在颠簸,且有些细胞对温度变化也很敏感,可能存在一些细胞脱落漂浮的情况,这些细胞仍是活细胞,请
勿丢弃,可离心富集后传代使用。
2. 对于贴壁的细胞,在生物安全柜环境中,用真空泵去除培养瓶中的多余培养基,至剩余5-8 mL左右,随后将细胞置于含有5% CO2的37℃恒温 培养箱中培养,拧松瓶盖。如果细胞已经长满培养瓶请立即传代。
3. 对于悬浮的细胞,在生物安全柜环境中,转移培养瓶中的细胞至离心管中,离心200×g /5 min,去除上清后,用5 mL培养基吹散细胞,转移至新的培养瓶中,随后置于含有5% CO 2的37℃恒温培养箱中培养。
冻存细胞操作步骤
注意:为保存细胞的高存活率,请收到产品后,立即解冻培养。
1.将冻存管置于37℃ 水浴中来回晃动,迅速解冻。为避免污染,确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速,大约2分钟。
2. 一旦冻存管中液体融化后,立即取出,采用 70%酒精喷拭冻存管表面。从此步开始,后续操作须在生物安全柜中完成。
3.将冻存管中的液体转移到含有5 mL完全培养基的离心管中,离心200×g/5 min,用真空泵去除含有冻存液的上清。
4. 用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率,请将培养基在37℃水浴预热后使用。
5. 将细胞置于含有5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。
贴壁细胞传代培养
1. 吸取并弃掉培养瓶中培养基, 加入PBS清洗一次。
2. 加入 1.0 mL 0.25(w/v)Trypsin-0.53 mM EDTA溶液,并置于37℃培养箱中孵育,直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3至5分钟(此处为12.5 cm2培养瓶所用体积,可根据实际情况增减用量)。
3. 加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶,并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落,并使细胞分散。
4. 离心200x g/5 min,去除上清后,取适量的培养基将细胞重悬,取适量悬液置于新的培养瓶中,并加入新鲜细胞完全培养基至总体积为4 mL。
5. 将细胞置于含有5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。传代比例:建议 1:2 至1:3 (以培养瓶底面积计算)培养基换液: 每隔 2 至 3 天。