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Advanced RNA 转染试剂
产品概述：
Advanced RNA转染试剂操作说明书
产品货号：AD30
一、试剂盒组分
Advanced RNA转染试剂： 货号AD30
稀释液： 货号X-DS
二、注意事项
复合物可转入含血清培养基中进行转染，24小时换液48小时收细胞
转染用的含血清培养基里面不含双抗培养基
使用高纯度的siRNA有助于获得较高的转染效率
建议转染试剂用量为 0.1 µL/ pmol siRNA
siRNA推荐实验浓度为40 nM
储存条件：4°C（拒绝冻融）有效期：1年
简易操作说明
一、实验中核酸准备要求
RNA 浓度20 uM /L。
二、操作流程
1、提前1天接种细胞：保证转染时细胞长至70-90%汇合度
2、稀释转染试剂：根据参考用量用稀释液稀释Advanced RNA™转染试剂
3、加入siRNA溶液：向2中加入siRNA溶液，充分混匀
4、孵育形成复合物：siRNA与转染试剂混匀后，室温孵育20-30分钟
注：为了达到更佳的转染效果，您可以在37℃下孵育形成复合物
5、在细胞中加入复合物：根据参考用量在细胞中加入复合物
6、分析结果：细胞继续培养2-3天后检测转染效果
三、以细胞培养板为例进行转染试剂及RNA的用量梯度说明
培养器皿 | siRNA浓度 | 每孔体积 | 转染试剂 | 转染试剂 稀释液 | 20µM siRNA | 培养基 |
96-well | 100 nM | 100 µL | 1 µL | 10 µL | 0.5 µL | 88.5 µL |
40 nM | 100 µL | 0.4 µL | 10 µL | 0.2 µL | 89.4 µL | |
20 nM | 100 µL | 0.2 µL | 10 µL | 0.1 µL | 89.7 µL | |
10 nM | 100 µL | 0.1 µL | 10 µL | 0.05 µL | 89.85 µL | |
24-well | 100 nM | 500 µL | 5 µL | 50 µL | 2.5 µL | 442.5 µL |
40 nM | 500 µL | 2 µL | 50 µL | 1 µL | 447 µL | |
20 nM | 500 µL | 1 µL | 50 µL | 0.5 µL | 448.5 µL | |
10 nM | 500 µL | 0.5 µL | 50 µL | 0.25 µL | 449.25 µL | |
12-well | 100 nM | 1 mL | 10 µL | 100 µL | 5 µL | 885 µL |
40 nM | 1 mL | 4 µL | 100 µL | 2 µL | 894 µL | |
20 nM | 1 mL | 2 µL | 100 µL | 1 µL | 897 µL | |
10 nM | 1 mL | 1 µL | 100 µL | 0.5 µL | 898.5 µL | |
6-well | 100 nM | 2 mL | 20 µL | 200 µL | 10 µL | 1770 µL |
40 nM | 2 mL | 8 µL | 200 µL | 4 µL | 1788 µL | |
20 nM | 2 mL | 4 µL | 200 µL | 2 µL | 1794 µL | |
10 nM | 2 mL | 2 µL | 200 µL | 1 µL | 1797 µL |
本产品仅用于科研。
引用及参考文献：
