原文期刊及DOI:
• 期刊名称:European Journal of Pediatrics
• DOI:10.1007/s00431-023-05398-y(https://doi.org/10.1007/s00431-023-05398-y)
实验细节:
• 转染细胞:
◦K562细胞(人慢性髓系白血病细胞系,用于模拟β-地中海贫血的造血功能研究)。
• 转染的基因/分子:
1. circ-0008102过表达载体(circ-0008102 overexpression vector)
2. 对照空载体(control vector)
3. 靶向circ-0008102的小干扰RNA(si-circ-0008102,序列:5′-GAACGGGGACACUUAGUCGTT-3′)
4. 阴性对照siRNA(si-control,序列:5′-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3′)
• 实验结果:
◦circ-0008102的功能验证:通过过表达和敲低circ-0008102,证实其可调控γ-珠蛋白(γ-globin)的表达,并负调控5 种miRNA(miR-372-3p、miR-329-5p、miR-198、miR-152-5p、miR-627-3p)的表达。
◦机制研究:circ-0008102通过吸附miRNAs(如miR-372-3p等)形成ceRNA网络,影响β-地中海贫血的病理进程(如 HbF水平升高)。
转染试剂作用:
ZETA life的Advanced DNA RNA转染试剂(货号AD600150)用于将上述载体和siRNA高效转染至K562细胞,验证circ-0008102在β-地中海贫血中的分子机制。